Bioestimulantes e inoculantes: lo que sabemos y lo que no

Por lo tanto no podemos afirmar compatibilidad con Bradyrhizobium japonicum, y esta página existe para dejar por escrito qué podemos y qué no podemos afirmar sobre esa combinación.

Por qué esto no es una discusión teórica

Sobre la semilla inoculada, el rizobio se muere rápido aun sin que le agregues nada. Muere el 75 % dentro de las primeras 2 horas, el 90 % a las 24 horas y el 95 % a las 48 horas (Lodeiro 2015, Revista Argentina de Microbiología 47(3), IBBM-UNLP/CONICET). La mortandad tiene dos fases: una rápida, del orden de 4 horas, donde se va la mayor parte, y una lenta que se estabiliza cerca de las 24 horas (Lodeiro 2015). A 30 °C la supervivencia de B. japonicum a las 24 horas es de apenas 5 a 10 %, y mejora si bajás la temperatura de almacenaje (Lodeiro 2015).

La causa principal es la desecación sobre la superficie de la semilla y, en menor medida, los contaminantes y las sustancias tóxicas, tanto las que trae la propia semilla como las que se agregan durante la inoculación (Lodeiro 2015).

Esa es la parte incómoda para cualquiera que venda bioestimulantes. La literatura argentina lo dice con nombre y apellido: la supervivencia de los rizobios "puede verse amenazada cuando además del inoculante se agregan otras sustancias, tales como fungicidas, insecticidas, micronutrientes o estimuladores de la germinación. No siempre estas sustancias resultan inocuas" (Lodeiro 2015). Micronutrientes y bioestimulantes aplicados a la semilla: esa es la familia en la que caemos nosotros. (No decimos "estimuladores de la germinación" porque ninguno de nuestros 26 ensayos midió germinación.)

Y el mecanismo no es la toxicidad intrínseca del producto, sino la concentración: sobre la película que queda en la semilla, en contacto íntimo con la bacteria, "aun con una baja toxicidad, la dosis resulta letal a mediano plazo" (Lodeiro 2015). El mismo autor pide un protocolo consensuado para descartar estos efectos. Nosotros no lo corrimos.

Cuánto margen tenés antes de quedarte sin rizobios

Ojo con cómo se lee esta tabla, porque son dos variables distintas y no se comparan entre sí. El rango de 4,9 × 10⁴ a 4,9 × 10⁵ es de rizobios inoculados por semilla; los 8,0 × 10⁴ son los que se establecen sobre ella, y el propio Lodeiro los enlaza: ese valor «es fácilmente alcanzable con el rango antedicho si se considera p adh = 0,15», es decir que ya es el resultado de aplicar la probabilidad de adhesión. Lo que sí cierra Lodeiro es que «un N ino de 4,9 × 10⁵ rizobios inoculados por semilla podría asegurar una buena competitividad»: o sea el techo del rango, no el piso. La conclusión práctica no cambia y es la que importa acá: el margen no sobra. Una mortandad adicional del 75 % en las primeras 2 horas te deja por debajo del piso de ese rango, y cualquier cosa que agregues juega en esa cuenta.

Hay un detalle regulatorio que conviene decir en voz alta. Para la categoría de protectores aplicados junto a la siembra, la norma argentina exige "análisis de laboratorio indicando el número de microorganismos obtenidos en su aplicación junto al inoculante y/o respuesta a la nodulación" (SENASA, Anexo II IF-2023-55039284, apartado "Requisitos generales — a) Protectores"). Nuestros productos no se registran en esa categoría y esa exigencia no nos alcanza; pero el tipo de prueba que el regulador pide ahí es exactamente el que a nosotros nos falta, y no vemos motivo para exigirnos menos que eso antes de afirmar nada. Y el inoculante microbiano es una categoría regulatoria distinta de la nuestra: un producto elaborado con microorganismos vivos, simbióticos, benéficos y seleccionados (Resolución SENASA 1004/2023, art. 3 inc. f).

El pH: por qué dos de nuestros productos no se acercan a la semilla inoculada

La extensión universitaria estadounidense lo resume sin vueltas: "DO NOT mix inoculated seed with fertilizer. Fertilizers are salts and acids. It will kill Rhizobia" (University of Florida IFAS Extension, Volusia County). La misma ficha desaconseja usar gaseosas como adherente porque su pH puede ser tan bajo como 2,0, "lo cual es dañino para los rizobios", y prohíbe la cal viva, hidratada o apagada sobre semilla inoculada porque daña a la bacteria (UF/IFAS).

En cultivo puro, B. japonicum USDA110 crece bien a pH 6,8 y 5,5 y prácticamente no crece a pH 4,5 (Manassila, Nuntagij, Tittabutr, Boonkerd y Teaumroong, 2012, African Journal of Biotechnology 11(83):14899-14910). A nivel de suelo, por debajo de pH 5,5 el ambiente ya es hostil para las especies sensibles y caen la nodulación y la fijación (GRDC / Acid Soils SA).

Contra esa escala, estos son nuestros datos de producto puro:

Tres aclaraciones honestas sobre esta tabla. La primera: es el pH del producto puro. No sabemos a qué pH queda la película sobre la semilla después de diluir, y eso es justamente lo que decide si el rizobio vive. La segunda: "< 0,05 %" es un valor medido de laboratorio y se publica tal cual, con su cifra; no quiere decir "sin cloruro". La tercera: hay cloruro medido en 12 de los 16 productos, y los valores más altos están en FULVEX 50S (5,62 %), NITROTECH 16 (3,37 %), K-FLOW 20 (3,23 %), PK-FLOW 20 (2,74 %) y NITROTECH 10 (2,32 %). Lo decimos porque la salinidad tiene efecto documentado: en las tres cepas sensibles de Bradyrhizobium evaluadas el crecimiento quedó inhibido en más del 95 % ya desde 0,1 M de NaCl (Dong et al. 2017, Int. J. Mol. Sci. 18(8):1625 — son cepas que nodulan Stylosanthes guianensis, no B. japonicum de soja, así que vale como señal del género, no como dato de soja), y un estrés salino de apenas 2 horas durante la interacción temprana, a 50 y a 150 mM de NaCl, redujo el número de nódulos de corona, y el efecto se atenuó parcialmente al agregar 5 mM de CaCl₂ (Muñoz et al. 2014, Functional Plant Biology 41: 96–105). Dos horas es exactamente lo que puede pasar una semilla mojada antes de entrar al surco.

Lo que pasa cuando la incompatibilidad es real

No es un riesgo abstracto. En ensayos del MGAP de Uruguay, el testigo dio 26,1 nódulos por planta y 371 mg de masa nodular; con Captan quedaron 0,5 nódulos por planta y 3 mg (Labandera, MGAP Uruguay, Revista del Plan Agropecuario nº107, Cuadro 3). TMTD dio 8,8 nódulos y PCNB 8,1. El mecanismo es en cadena: el producto afecta la sobrevivencia de la bacteria y detrás caen el establecimiento de la simbiosis, la producción de nódulos y la fijación (Labandera, MGAP).

Pero tampoco todo daña igual. SDSU documenta que Captan y PCNB reducen severamente la supervivencia de Rhizobium sobre semilla tratada, mientras que thiram, fludioxonil, mefenoxam y metalaxil tienen poco o ningún efecto (South Dakota State University Extension, iGrow Soybean BMP cap. 8). Conclusión operativa: la compatibilidad se mide producto por producto, no se deduce. Por eso no vale decir "es orgánico, entonces no molesta".

Hay un antecedente que cierra el argumento: el cobalto y el molibdeno son indispensables para la fijación y aun así Embrapa recomienda no ponerlos en la semilla sino pulverizarlos a la hoja entre V3 y V5, porque son tóxicos para la bacteria (Embrapa Soja, folder 2012). Un nutriente necesario puede ser letal en ese punto de contacto.

Qué recomendamos mientras no tengamos el dato

La salida lógica es sacar el producto del punto de contacto: aplicación al surco o foliar, separada de la inoculación. Tampoco ensayamos eso, ni el efecto de nuestros productos sobre la población naturalizada de rizobios del suelo.

Protocolo para comprobarlo vos mismo, esta campaña

No hace falta un laboratorio. Hace falta un testigo apareado y paciencia para lavar raíces.

1. Elegí un lote uniforme y marcá dos franjas contiguas, de la misma variedad y el mismo lote de semilla, misma fecha, misma sembradora, mismo inoculante y mismo lote de inoculante. Una es TESTIGO (solo inoculante) y otra es TRATAMIENTO (inoculante + el producto que querés evaluar, en la dosis y en el punto de aplicación que vas a usar de verdad).
2. Repetí la pareja al menos tres veces en distintas partes del lote. Una sola comparación no distingue tratamiento de variabilidad de suelo.
3. Anotá la hora. Momento de inoculación, momento de agregar el producto, momento de siembra, temperatura y si la semilla estuvo al sol. Con una mortandad del 75 % a las 2 horas (Lodeiro 2015), el reloj es una variable del ensayo.
4. Primer muestreo en V4. Sacá al azar 10 plantas por tratamiento y por repetición, de líneas laterales, respetando bordura (Fornasero y Toniutti 2015, FAVE Secc. Cienc. Agrar. 14(1), UNL).
5. Segundo muestreo en R5, con las mismas 10 plantas por parcela. Extraé la raíz con su pan de tierra, 30 cm de profundidad y 20 cm a cada lado, lavá sobre tamiz de 1 mm y separá los nódulos a mano (Pietrarelli et al. 2008, Agriscientia 25(2), UNC).
6. Contá por separado nódulos en raíz principal y en raíces secundarias (metodología de Pietrarelli et al. 2008). Si además vas a pesarlos, secalos en estufa a 60 °C hasta peso constante (Navarro et al. 2015, EEA INTA Marcos Juárez) y anotá que es peso seco: la referencia publicada de 800 a 1000 mg por planta es de peso seco, así que pesar nódulos húmedos y compararlos contra esa cifra te da un éxito aparente donde puede no haberlo, porque el nódulo fresco pesa bastante más que el seco. Si podés, registrá el porcentaje de nódulos funcionales, cortándolos: el interior rosado es el que fija (metodología de Pietrarelli et al. 2008).
7. Compará contra estos números publicados, no contra tu memoria:

Una advertencia sobre esta última fila, porque es donde más fácil te equivocás. El valor es de peso seco y no es un dato original de Pietrarelli: ellos lo citan de Perticari et al. (2003) y lo discuten en peso seco, aunque en Materiales y Métodos declaran peso fresco. Y no es un número pacífico: Navarro et al. (2015) menciona que Perticari observó en R5 un peso de nódulos de 7 a 10 mg por planta —cien veces menos— sin describir con qué método lo obtuvo, y su propio muestreo es otro (cilindro de 22 cm de diámetro a 12 cm de profundidad, en R2). Si vas a pesar, secá en estufa a 60 °C hasta peso constante (Navarro et al. 2015), anotá el método y decí contra qué referencia comparás. Si no vas a secar, quedate con el conteo de nódulos, que es mucho más robusto.

1. Regla de decisión. Si el tratamiento queda por debajo del testigo de forma consistente en las tres repeticiones, no lo repitás a escala de lote. La caída puede ser brutal y evidente a simple vista: en el caso documentado del Captan fue de 26,1 a 0,5 nódulos por planta (Labandera, MGAP).
2. Guardá la información: fotos de raíces con regla, planilla de conteo por planta y las horas del punto 3. Si nos la mandás, la usamos —con tu permiso y citándote— para armar la evidencia que hoy no existe.

Lo que no sabemos

No ensayamos ninguno de nuestros 16 productos con Bradyrhizobium: no tenemos UFC por semilla, ni recuento de nódulos, ni datos de fijación, ni siquiera el pH y la conductividad de una mezcla de tanque con un inoculante comercial —conocemos el pH del producto puro, no el de la película que queda sobre la semilla, que es lo que decide si la bacteria vive—. De 10 de los 16 productos ni siquiera tenemos el pH medido. No ensayamos la aplicación al surco ni al suelo sobre la población naturalizada de rizobios. Tampoco decimos "sin cloruros": el cloruro está medido en 12 de los 16 productos y lo publicamos con su cifra, desde 5,62 % hasta < 0,05 %, y de los otros cuatro decimos que no está medido. Cuando tengamos alguno de estos datos, se publica acá con la metodología completa, salga como salga.